Come riavviare una colonna C18

Passaggio 1

Scollegare la colonna C18 dal flusso e sostituire la colonna nella direzione opposta. Riattivare il solvente attraverso la colonna nella direzione opposta allenterà l'effetto di imballaggio che si verifica nel tempo. Bisogna fare attenzione a non perdere una grande quantità di materiale di imballaggio alla fine della colonna. Alcuni produttori utilizzano una maglia più grande all'estremità a monte della colonna, in modo tale che quando la direzione del flusso viene invertita, la maglia più grande si trova nella posizione a valle. Questo metodo di rigenerazione è chiamato backwashing. Per proteggere dal materiale di imballaggio che fluisce nel rivelatore del sistema e possibilmente causando una spina, consente al sistema di funzionare senza il rivelatore collegato e indirizzare il flusso di uscita della colonna verso i rifiuti.

Passaggio 2

Posizionare il tubo di ingresso del solvente in una serie di solventi per eluire i composti trattenuti con la colonna nella direzione opposta. La serie di solventi utilizzati varia nelle loro caratteristiche idrofile. Variando i solventi si eleveranno composti di natura idrofila ugualmente varia. Utilizzare a turno 50 mi di ciascuno dei seguenti solventi: acqua (se si utilizza un tampone nel solvente), metanolo, isopropanolo, diclorometano, esano, diclorometano e isopropanolo.

Passaggio 3

Ricollegare la colonna con l'orientamento corretto ed eseguire il solvente attraverso il sistema. Utilizzare almeno 75 ml di solvente per lavare la colonna prima di procedere. Esegui un test di iniezione di uno standard che hai eseguito quando la colonna era nuova e controlla i risultati. Prestare particolare attenzione alle ore di massima ritenzione, code di picco e il tempo totale di analisi. Il grado in cui questi attributi coincidono con l'esecuzione iniziale della colonna quando era nuovo indica il grado in cui la colonna è stata rigenerata. Se i risultati non sono soddisfacenti, sostituisci la colonna con una nuova e getta la vecchia colonna nel cestino.